第二节　精液品质检查

一、精液的外观性状检查

（一）采精量

采精后将精液盛装在有刻度的试管或精液瓶中，可测出精液量的多少。猪和马的精液应用4～6层的消毒纱布过滤或离心处理，除去胶状物质。各种家畜的采精都有一定范围，精液量与正常差异较大，应查明原因，及时调整采精方法或对公畜进行治疗。

（二）颜色

精液一般为乳白色或灰白色，精子密度越大，精液的颜色越深。牛、羊的精液呈乳白或厚乳白色，有时呈淡黄色。马、猪的精液为淡乳白或灰白色。若精液呈红色，说明混有鲜血。精液呈褐色，是混有陈血。精液呈淡黄色则是混有脓汁或尿液。颜色异常的精液应废弃，立即停止采精，查明原因，及时治疗。

（三）气味

正常精液略带有腥味，牛、羊精液除具有腥味外，另有微汗脂味。气味异常往往伴有颜色的变化。

（四）云雾状

牛、羊的精液精子密度大，放在玻璃容器中观察，精液呈上下翻滚状态，像云雾一样。称为云雾状。这是精子运动活跃的表现。云雾状明显可用“+++”表示；较明显用“++”表示；不明显用“+”表示。

二、精子活力检查

精子活力又称活率，是指精液中做直线运动的精子占整个精子数的百分比。活力是精液检查最重要的指标之一，在采精后、稀释前后、保存和运输前后、输精前都要进行检查。

（一）检查方法

检查精子活力需借助显微镜，放大200～400倍，把精液样品放在镜下观察。用于检查精液品质的显微镜保温箱如图5-13所示。

图5-13　显微镜保温箱（单位：cm）

1.平板压片

取1滴精液于载玻片上，盖上盖玻片，放在镜下观察。此法简单、操作方便，但精液易干燥，检查应迅速。

2.悬滴法

取1滴精液于盖玻片上，迅速翻转使精液形成悬滴，置于凹玻片的凹窝内，即制成悬滴玻片，如图5-14所示。此法精液较厚，检查结果可能偏高。

图5-14　悬滴玻片

（二）评定标准

评定精子活力多采用“十级一分制”，如果精液中有80%的精子做直线运动，精子活力计为0.8；如果有50%的精子做直线运动，活力计为0.5，以此类推。评定精子活力的准确度与经验有关，具有主观性，检查时要多看几个视野，取平均值。

牛、羊及猪的精液精子密度较大，为观察方便，可用等渗溶液如氯化钠溶液等稀释后再检查。温度对精子活力影响较大，为使评定结果准确，要求检查温度在37℃左右，显微镜需有恒温装置。

三、精子的密度检查

精子密度是指单位体积（cm³）精液内所含有精子的数目，是评定精液品质的重要指标之一。

（一）估测法

估测法通常结合精子活力检查进行。精子间的间隙小于一个精子长度为密；间隙相当于一个精子长度为中等；大于一个精子长度为稀。这种方法能大致估计精子的密度，主观性强，误差较大。

精子密度较高，如图5-15（a）所示，精子布满了整个视野，难以看清单个精子的运动。估计每毫升精液的精子数为10亿个以上。

精子密度中等，如图5-15（b）所示，精子之间空隙明显，彼此之间距离有一个精子的长度。估计每毫升精液的精子数为8亿个左右。

精子密度较低，如图5-15（c）所示，视野中精子分布稀疏，精子间距超过一个精子长度。估计每毫升精液的精子数为1亿～2亿个。

图5-15　牛精子密度示意图

注：若视野中无精子，则用“无”表示。

（二）血细胞计数法

用血细胞计数法定期对公畜的精液进行检查，可较准确地测定精子密度。血细胞计数器中有一计算室和两个稀释用的吸管，红细胞吸管能对精液进行100或200倍稀释，适用于牛、羊的精液检查；白细胞吸管能对精液进行10或20倍稀释，适合用于猪和马的精液检查。红细胞计算板上的计算室的高度为0.1mm，边长为1mm，呈正方形，由25个中方格组成，每一中方格分为16个小方格，如图5-16所示。

5-16　血细胞计数板的计算方格

检查时，用3%的氯化钠溶液对精液进行稀释并杀死精子。于显微镜下，从25个中方格中选取四角和中央5个计数。对于压线的精子，以精子头部为准，采用“上计下不计，左计右不计”的方法计数。最后按公式进行计算，公式如下。

1mL原精液中的精子总数＝5个中方格内精子数×5（25个中方格）×

10（1mm³内精子数）×1000（1mL=1000mm³）×稀释倍数

（三）光电比色法

世界各国普遍用光电比色法进行牛、羊精液的密度测定。此法快速、准确、操作简便。其原理是根据精液的透光性，精子密度越大，透光性就越差。

事先将原精液稀释成不同倍数，用血细胞计数法计算精子密度，从而制成精液密度标准管，然后用光电比色计测定其透光度，根据透光度求每相差1%透光度的级差精子数，编制成精子密度对照表备用。测定精液样品时，将精液稀释80～100倍，用光电比色计测定其透光值，查表即可得知精子密度。

四、精子的其他检查项目

（一）精子的畸形率检查

凡形态和结构不正常的精子都属于畸形精子。通常精子畸形率，牛、猪不超过18%，羊不超过14%；马不超过12%。如果畸形精子超过20%则视为精液品质不良，不能用作输精。

（二）精子顶体异常率检查

精子顶体异常会导致受精障碍。顶体异常有膨胀、缺损、脱落等。当精子顶体异常率超过14%，受精能力就会明显下降。检查精子顶体异常率的方法是，先把精液制成抹片，干燥后用95%的酒精固定，水洗后用姬姆萨液染色1.5～2h，再水洗干燥，用树脂封装放在镜下1000倍观察，随机观察500个精子，计算顶体异常率。

（三）精子生存时间和生存指数检查

精子的生存时间和生存指数与受精能力有关，也是鉴定精液处理效果的一种方法。精子生存时间是指精子总的存活时间，检查时将精液置于一定的温度下，每隔8～12h检查精子活力，直至无活动精子为止。所有间隔时间累加后减去最后两次间隔时间的一半即为精子的生存时间。生存指数是指相邻两次检查的间隔时间与平均活力的乘积之和，精子生存时间越长，生存的指数越大，说明精子活力越强，精液品质越好。

【实践】

根据本节的学习内容，由学生自行分配学习。

（1）精液的外观性状检查。

（2）精子活力检查。

（3）精子的密度检查。

（4）精子的其他检查

将学生分成4个小组讨论，每个小组认真学习一个知识点，再从每个小组中选1名同学进行发言，交流所学知识点的主要内容，其他组的同学可随机对发言者进行提问，由发言者及其组员共同回答和解决所提出的问题，以达到全班同学共同学习、共同掌握本节中所有知识点的目的。教师对各组同学的发言交流进行点评，并补充讲解遗漏的知识内容，最后，再进行学习评价及反思。

具体实施步骤如下：

第一步：各小组认真组织学习（20min）。

第二步：发言交流（20min）。

第三步：学生提问和回答（20min）。

第四步：教师总结和点评（10min）。

第五步：评价及反思（20min）。

本次实践考核分数组成：总分100分，其中理论知识掌握占50分，技能操作占50分。

将分数填入表5-3中。

表5-3　考核评价表