第三节　精液稀释

一、精液稀释的目的

精液稀释是采精及精液品质检查后，向精液中添加的适合精子体外存活并保持受精能力的液体。精液稀释的目的如下。

（1）扩大精液量，增加一次采精量的可配母畜数。

（2）通过向精液中添加营养物质和保护剂，可延长精子在体外的存活时间。

（3）便于精液保存和运输。

二、稀释液的成分及作用

（一）稀释剂

稀释剂主要用来扩大精液容量，要求所选用的药液必须与精液具有相同的渗透压。严格地讲，凡向精液中添加的稀释液都具有扩大精液容量的作用，均属于稀释剂的范畴。但各种物质添加各有其主要作用，一般用来单纯扩大精液量的物质有等渗的氯化钠、葡萄糖、蔗糖溶液等。

（二）营养剂

营养剂主要为精子体外代谢提供养分，补充精子消耗的能量。如糖类、奶类、卵黄等。

（三）保护剂

1.缓冲物质

精子在体外不断进行代谢，随着代谢产物（乳酸和CO₂等）的累积，精液的pH值逐渐下降，甚至会发生酸中毒，使精子不可逆地失去活力。因此，有必要向精液中添加一定量的缓冲物质，以平衡酸碱度。常用的缓冲剂有柠檬酸钠、酒石酸钾钠、磷酸二氢钾等。近些年，生产单位采用三（羟甲基）氨基甲烷作为缓冲剂，效果较理想。

2.降低电解质浓度

副性腺中Ca²⁺、Mg²⁺等强电解质含量较高，刺激精子代谢和运动加快，在自然繁殖中有助于受精，但这些强电解质又会造成精子早衰、缩短精液保存时间。为此，需向精液中加入非电解质或弱电解质，以降低精液电解质的浓度。常用的非电解质和弱电解质有各种糖类、氨基乙酸等。

3.抗冷物质

在精液保存过程中，常进行降温处理，如温度发生急剧变化，会使精子遭受冷休克而失去活力。发生冷休克的原因是精子内部的缩醛磷脂在低温下冻结凝固，影响精子正常代谢，出现不可逆的变性死亡。因此，在保存的稀释液中加入抗冷物质，使精子免受伤害。常用的抗冷休克物质有卵黄、奶类等。

4.抗冻物质

在精液冷冻保存过程中，精液由液态向固态转化，对精子的危害较大。不使用抗冻剂，冷冻精液就不能成功。一般常用甘油和二甲基亚砜作为抗冻剂。

5.抗菌物质

在采精和精液处理过程中，即使严格遵守操作规程，也难免使精液受到细菌的污染，况且稀释液中的营养物质较丰富，给细菌繁殖提供了较好条件。细菌过度繁殖不但影响精液品质，输精后也会使母畜生殖道感染，造成不孕。常用的抗菌物质有青霉素、链霉素、氨基苯磺胺等。

（四）其他添加剂

除上述三种成分以外，另向精液中添加的、起某种特殊作用的微量成分都属于其他添加剂的范畴。

1.激素类

向精液中添加催产素、前列腺素E型等，能促进母畜子宫和输卵管的蠕动，有利于精子运行，提高受胎率。

2.维生素类

某些维生素如B₁、B₁₀、B₁₂、C、E等具有改进精子活力，提高受胎率的作用。

3.酶类

过氧化氢酶能分解精液中的过氧化氢，提高精子活力；β-淀粉酶能促进精子获能等。另外，向精液中添加有机酸、无机酸类进行常温保存；加入抗氧化剂、提高精子活力的精氨酸、咖啡因；区分精液种类的染料等都属于此类。

三、稀释液的配制

（1）稀释液应现用现配，如配制后确需保存，经消毒、密封后放入冰箱中最多能保存2～3d。

（2）配制稀释液的器具，用前必须洗净并严格消毒，用稀释液冲洗后才能使用。

（3）配制稀释液的蒸馏水要新鲜，最好现用现制。

（4）所用药品要纯净，一般使用分析纯制剂。药品称量要准确，经溶解、过滤、消毒后方能使用。

（5）卵黄要取自新鲜鸡蛋，待稀释液消毒冷却后加入。

（6）奶粉的颗粒比较大，溶解时先用等量蒸馏水调成糨糊状，然后加蒸馏水至需要量，用脱脂棉过滤后放入90～95℃的水浴中消毒10min。

四、精液稀释方法

精液稀释应在采精后立即进行。采精后把精液迅速置于30℃的保温瓶中，以防温度的变化。稀释时把精液和稀释液同时放在30℃的环境中，将稀释液和精液的浓度调整一致，并在30℃的水浴中进行稀释。稀释时把稀释液沿着精液容器的壁慢慢加入精液中，边加入边搅拌。如需高倍稀释，应先做3～5倍的低倍稀释，然后再做高倍，以防稀释打击。

五、精液的稀释倍数

精液的稀释倍数应依据母畜每次受精所需的有效精子数、稀释液的种类等来确定。公牛的精液一般进行10～40倍稀释，公猪的精液一般做2～4倍稀释。各种家畜精液稀释倍数见表5-4。

表5-4　各种家畜精液稀释倍数

现以公牛精液稀释倍数的计算方法举例如下。

有一头黑白花种公牛一次采得鲜精液10mL，经检查，精子活力为0.7，密度是12亿/mL。若为母牛输精时要求有效精子数不少于3000万，输精量为0.25mL，本次采得的精液处理后，能为多少头母牛输精？

解：lmL原精液中的有效精子数＝12亿/mL×0.7＝8.4亿/mL。

lmL稀释后的精液中的有效精子数＝0.3亿÷0.25mL＝1.2亿/mL

稀释倍数＝8.4亿/mL÷1.2亿/mL＝7（倍）

输精母牛头数＝10mL×7（倍）÷0.25mL＝280（头）

答：本次采得的精液能为280头母牛输精。

【实践】

根据本节的学习内容，由学生自行分配学习。

（1）精液稀释成分、作用。

（2）稀释液的配制。

（3）精液稀释方法。

（4）精液的稀释倍数。

将学生分成4个小组讨论，每个小组认真学习一个知识点，再从每个小组中选1名同学进行发言，交流所学知识点的主要内容，其他组的同学可随机对发言者进行提问，由发言者及其组员共同回答和解决所提出的问题，以达到全班同学共同学习、共同掌握本节中所有知识点的目的。教师对各组同学的发言交流进行点评，并补充讲解遗漏的知识内容，最后，再进行学习评价及反思。

具体实施步骤如下。

第一步：各小组认真组织学习（20min）。

第二步：发言交流（20min）。

第三步：学生提问题和回答提问（20min）。

第四步：教师总结和点评（10min）。

第五步：评价及反思（20min）。

本次实践考核分数组成：总分100分，其中理论知识掌握占50分，技能操作占50分。

将分数填入表5-5中。

表5-5　考核评价表